篇一：实验室常用液体配制标准操作规程
常用液体配制标准操作规程（SOP）
国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心
二〇〇八年九月修订
目录
一、细菌培养系统（责任人：郑子峥）
二、DNA操作系统 （责任人：罗文新、陈瑛炜）
三、蛋白质操作系统（责任人：李少伟、顾颖、潘晖榕）
四、细胞培养相关（责任人：程通、张涛）
五、单克隆抗体制备系统（责任人：陈毅歆、）
六、EIA系统（责任人：葛胜祥、熊君辉）
一、细菌培养系统
1、LB培养基:
每1000mL加分析纯NaCl 10g ，蛋白胨 10g，酵母粉5g，用ddH2O配制，再用10M NaOH调pH至7.4(1000mL一般加450ul)，高压蒸汽灭菌15min冷却后使用。
2、固体培养基:
LB培养基中加入琼脂至1.5％，高压蒸汽灭菌15min后使用。 3、10%(g/V) 氨苄青霉素钠（Ap）：
注射用氨苄青霉素钠（粉末）50g溶于500ml无菌去离子水中，溶解后分装入4ml灭菌的EP管，全程超净工作台内操作，避免染菌，分装后－20度保存，培养细菌时做1000×使用。
注：如果购买的氨苄青霉素粉末不是无菌包装的，溶解后需用0.22滤膜过滤除菌后再分装。
4、2.5%(g/V)硫酸卡那霉素（Kan）
注射用硫酸卡那霉素（液体）通常是2ml/支，内含0.5g卡那霉素。取25支药剂（50ml），加入450ml无菌去离子水中，分装入4ml灭菌的EP管，全程超净工作台内操作，避免染菌，分装后－20度保存，培养细菌时做1000×使用。
注：如果购买的卡那霉素是粉末状的非无菌包装，溶解后需用0.22滤膜过滤除菌后再分装。
5、细菌培养：
配制相应抗性培养基，每试管倒入3~4ml培养基（卡那霉素抗性
培养采用标记试管），无菌牙签挑取单克隆至试管中，于37℃，220rpm培养。剩余培养基做好抗性和日期标记，置于4℃保存。
6、化学感受态制备：
1）原理:：
细菌处于容易吸收外源DNA的状态叫感受态，这时的菌细胞称为感受态细胞（Competent cell）。将细菌置于0℃，低渗CaCl2 溶液中时，菌细胞壁和膜的通透性增强，菌体膨胀成球型。外源DNA与Ca2+形成抗DNase的羟基-钙磷酸复合物黏附于细胞表面，在经42℃短暂的热冲击处理（一般热休克90s）后能促进细胞吸收外源DNA复合物。
2）仪器、材料与试剂：
① 超净工作台、低温离心机、摇床、-80℃冰箱，装液氮的泡沫盒及液氮、50ml的离心管2个，50ml的注射器及0.22um小过滤器各1个。高压灭菌的纸张、透气膜、1.5ml的EP管约350-500个，两块10cm的平皿板及接种环。
②TB缓冲液：每200ml液体中含Mncl2.4H20(2.176g)、Cacl2.2H2O(0.44g)、Kcl(3.73g)、PIPES(0.67g)。（注：在电子天平上的误差<50mg,因Mncl2.4H20在PH=6.7易溶故先将其它药品用超纯水溶解,并用KOH及HCL调PH至6.7。在加入Mncl2.4H20溶解后用超纯水定溶至相应的量，采用50ml的注射器及小过滤器过滤,一般储存在-20℃,时间<25天,否则易被氧化颜色呈粉红。）
③LB液体培养基：参见前面介绍。
④LB固体培养基：参见前面介绍。
⑤1管DH5α的菌种
3）步骤：
①倒无抗性的固体培养板，用接种环沾取感受态甘油菌画线,置于37℃恒温培养箱中培养过夜。
②在超净台里采用小枪尖挑取培养板中的单克隆菌(菌落的大小约2~3mm)转接于200~250ml的LB液体培养基中,盖上透气膜。
③置于摇床上，18℃、200- 250rpm速度摇约需3~5天，使OD600=0.4~0.7（对数生长期或对数生长前期）时开始制备。
④取出TB缓冲液及无菌的50ml离心管置于4℃冰浴中，预冷低温高速离心机（4℃、2500rpm、10min）。
⑤在50ml的离心管中加入约35ml-45ml的菌液，在4℃中冰浴10min。
⑥取出后放置于离心机上离心4℃、2500rpm、10min。
⑦弃上清液，在灭过菌的吸水纸上扣干（可重复多次收集菌体），先用约5~15ml的TB缓冲液重悬，再加至35ml的量（在冰上操作）冰浴10min。
⑧重复⑥+⑦的步骤一次。
⑨在35ml的TB缓冲液重悬后缓慢加入终浓度为7%的DMSO，混匀后在冰上冰浴10min。
⑩分装成100-150ul/管（1.5ml的EP管）浸入液氮中速冻，分装约300多管后转移放置于-80℃冰箱保存。
篇二：标准溶液配制作业指导书
标准溶液配制作业指导书
1. 目的：
保证化学检验过程中使用的标准溶液及试液在有效期间内的可靠性及被检测样品分析结果的准确与真实性。
2. 适用范围：
使用于实验室化学分析用各类溶液的制备和使用。
3. 权责范围：
化验员应严格遵照该作业指导书各项规定，技术负责人负责监督实施。
4. 标准溶液定义：是已确定其主体物质浓度或其他特性量值的溶液，直接参与测量结果计算的溶液，其准确与否直接关系到测量结果及准确度。
5. 标准溶液制备
参照GBT 601-2002 《化学试剂 标准滴定溶液的制备》的要求进行制备。 所用试剂的纯度应在分析纯以上，所用制剂及制品，应按GB/T 603-2002的规定制备，实验用水应符合GB/T 6682-1992中三级水的规格。
6.溶液有效期规定
标准溶液如无特殊规定，一般在常温（150C-250C）下保存不超过两个月，并应每次使用前检查外观，必要时进行复核标定，对于常用标准溶液在有效期前应配制新溶液并标定，对于不常用和不稳定的标准溶液，可随用随配制或标定。当溶液出现浑浊、沉淀、颜色变化等现象时，应重新制备。
7.相关注意事项
7.1、试剂所标的浓度和体积，准确计算应称量的试剂量。
7.2、试剂需要干燥时，取比需要量稍多的试剂放到干燥器中冷却。
7.3、把经过充分洗涤干净的称量瓶放在115℃恒温箱中加热干燥30min取出后放在干燥器中冷却30min，用此称量瓶准确称取试剂。
7.4、配制标准溶液应专人负责，计算及称量的数值都要记在专用的记录本上备查。
7.5、把容量瓶中的试剂转移到烧杯时，应用蒸馏水多次冲洗称量瓶，使残留的试剂完全转入到烧杯中。
7.6、在烧杯中将试剂溶解后，要毫无损失地转移到容量瓶中，为使试剂溶液不残留应用洗瓶冲洗烧杯内壁数次，并且将这种洗液一并移入容量瓶中。
7.7、当遇到一定要用化学处理才能溶解或不加热难于溶解的物质时，要在溶解操作完全结束，溶液冷却至室温后再移入容量瓶。
7.8、将容量瓶置于平坦的试验台上加水，接近标线时应特别小心，一滴一滴地加入直至达到标线为止。
7.9、容量瓶中的溶液必须反复振荡混合，使其充分均匀。
7.10、如果是配制待标定的溶液，根据计算量称取后放在烧杯中溶解，直接移入试剂贮瓶中待标定。
7.11、已配制和标定好的标准溶液，须注意保存。对见光易分解的溶液，应贮存于棕色瓶中或放于暗处。贮液瓶必须密封，以免水分蒸发使溶液浓度改变（最好用蜡密封）。
7.12、易分解的溶液，使用前最好作一次检查。有些溶液每次少配些，随用随配。有些溶液要定期检查浓度，尤其是当温差变动较大时更应勤检查。
7.13、所有试剂瓶上都要贴好标签，标签上应写明名称、浓度、配制日期。
7.14、标定标准滴定溶液的浓度时，须两人进行实验，分别各做四平行。
8.标准溶液的配置与标定
8.1 氢氧化钠（NaoH）标准溶液的配置和标定（0.05mol/L）
配制
8.1.1 称取12g NaoH溶于10ml蒸馏水中，震荡使之溶解成饱和溶液，冷却后置于聚乙烯塑料瓶中，密封，澄清后备用。
8.1.2 吸取3ml澄清的氢氧化钠饱和液定容至1000ml蒸馏水中，摇匀。 标定
8.1.3 准确称取于 105`C--110℃电烘箱中干燥至恒重的工作基准试剂邻苯二甲酸氢钾0.3g，加80ml蒸馏水，使之尽量溶解，加2滴酚酞指示液，用本溶液滴定至溶液呈粉红色，30s不褪色。
8.2硝酸银标准滴定溶液的配制（0.1mol/L）
配制
8.2.1称取 17.5 g 硝酸银，溶于1000m L水中，摇匀。溶液贮存于棕色瓶中。
标定
8.2.2 淀粉指示液的配制：称取0.5g可溶性淀粉，加入约5ml水，搅匀后缓缓倒入100ml沸水中 ，随加随搅拌，煮沸2min，放冷，备用。此指示剂应临用时配制。
8.2.3 荧光黄指示液的配制：称取0.5g荧光黄，用乙醇溶液溶解并稀释至100ml.
8.2.4 标定：准确称取0.2g在270℃干燥至恒重的基准氯化钠，加入50ml蒸馏水使之溶解，加入5ml淀粉指示液，边摇动边用硝酸银标准溶液避光滴定，近终点时，加入3滴荧光黄指示液，继续滴定浑浊液由黄色变为粉红色。
8.2.5 计算
??=??×0.05844C——硝酸银标准滴定溶液的实际浓度，单位（mol/L）。 ??
M——基准氯化钠的质量，单位（g）。
V——硝酸银标准溶液的用量，单位（ml）。
0.05844——与1.00ml硝酸银标准滴定溶液［c（AgNO3）=1mol/L］相当的
基准氯化钠的质量，单位（g）。
8.3 硫代硫酸钠标准滴定溶液的配制（0.100mol/L）
配制
8.3.1 称取 26 g 硫代硫酸钠(Na2S2O3 ·5H20)(或 16g 无水硫代硫酸钠)，
加 0.2 g 无水碳酸钠，溶于1000 mL蒸馏水水中使之溶解，并稀释至1000ml，混匀，放置备用。
标定
8.3.2 淀粉指示液的配制：称取0.5g可溶性淀粉，加入约5ml水，搅匀后缓缓倒入100ml沸水中 ，随加随搅拌，煮沸2min，放冷，备用。此指示剂应临用时配制。
8.3.3 硫酸（1+8）：吸取10ml硫酸，慢慢倒入80ml蒸馏水中。
8.3.4 标定：准确称取0.15g在120℃干燥至恒重的基准重铬酸钾，置于500ml碘量瓶中，加入50ml蒸馏水使之溶解。加入2g碘化钾，轻轻震荡使之溶解。在加入20ml硫酸（1+8），密封，摇匀，放置暗处10min后用250ml蒸馏水稀释。用硫代硫酸钠标准溶液滴定至溶液呈浅黄绿色，在加入3ml淀粉指示液，继续滴定至蓝色消失而显亮绿色。反映也即稀释用水的温度不应高于20℃。
8.3.5计算
????=C——硫代硫酸钠标准滴定溶液的实际浓度，单位（mol/L）。
m——基准重铬酸钾的质量，单位（g）。
V1——硫代硫酸钠标准溶液的用量，单位（ml）。
V2——试剂空白试验中硫代硫酸钠标准滴定溶液的用量，单位（ml）。 0.04903——与1.00ml硫代硫酸钠标准滴定溶液［c（Na2S2O3 ·5H20）
=1.000mol/L］相当的重铬酸钾的质量，单位（g）。
篇三：实验室常用溶液的配制
实验室常用溶液的配制
2008年10月16日 星期四 15:09
实验室常用溶液的配制
1．30%丙烯酰胺溶液
【配制方法】将29g丙烯酰胺和1g N，N’-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为60ml的水中。加热至37℃溶解之，补加水至终体积为100ml。用Nalgene滤器（0.45μm孔径）过滤除菌，查证该溶液的pH值应不大于7.0，置棕色瓶中保存于室温。
【注意】丙烯酰胺具有很强的神经毒性并可以通过皮肤吸收，其作用具累积性。称量丙烯酰胺和亚甲双丙烯酰胺时应戴手套和面具。可认为聚丙烯酰胺无毒，但也应谨慎操作，因为它还可能会含有少量未聚合材料。一些价格较低的丙烯酰胺和双丙烯酰胺通常含有一些金属离子，在丙烯酰胺贮存液中加入大约0.2体积的单床混合树脂（MB-1Mallinckrodt），搅拌过夜，然后用Whatman 1号滤纸过滤以纯化之。在贮存期间，丙烯酰胺和双丙烯酰胺会缓慢转化成丙烯酰和双丙烯酸。
2．40%丙烯酰胺
【配制方法】把380g丙烯酰胺（DNA测序级）和20g N，N’-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为600ml的蒸馏水中。继续按上述配制30%丙烯酰胺溶液的方法处理，但加热溶解后应以蒸馏水补足至终体积为1L。
【注意】见上述配制30%丙烯酰胺的说明，40%丙烯酰胺溶液用于DNA序列测定。
3．放线菌素D溶液
【配制方法】把20mg放线菌素D溶解于4ml 100%乙醇中，1：10稀释贮存液，用100%乙醇作空白对照读取OD440值。放线菌素D（分子量为1255）纯品在水溶液中的摩尔消化系数为21，900，故而1mg/ml的放线菌素D溶液在440nm处的吸光值为0.182，放线菌素D的贮存液应放在包有箔片的试管中，保存于-20℃。
【注意】放线菌素D是致畸剂和致癌剂，配制该溶液时必须戴手套并在通风橱内操作，而不能在开放在实验桌面上进行，谨防吸入药粉或让其接触到眼睛或皮肤。
药厂提供的作治疗用途的放线菌素D制品常含有糖或盐等添加剂。只要通过测量贮存液在440nm波长处的光吸收确定放线菌素D的浓度，这类制品便可用于抑制自身引导作用。 4．0.1mol/L腺苷三磷酸（ATP）溶液
【配制方法】在0.8ml水中溶解60mg ATP,用0.1mol/L NaOH调至pH值至7.0，用蒸馏水定容1ml，分装成小份保存于-70℃
5．10mol/L乙酸酰溶液
【配制方法】把770g乙酸酰溶解于800ml水中，加水定容至1L后过滤除菌。
6．10%过硫酸铵溶液
【配制方法】把1g过硫酸铵溶解于终量为10ml的水溶液中，该溶液可在4℃保存数周。
7．BCIP溶液
【配制方法】把0.5g的5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸二钠盐（BCIP）溶解于10ml 100%的二甲基甲酰胺中，保存于4℃
8．2×BES缓冲盐溶液
【配制方法】用总体积90ml的蒸馏水溶解1.07g盐溶液BES[N，N-双（2-羟乙基）-2-氨基乙磺酸]、1.6g NaCl和0.027g Na2HPO4，室温下用HCl调节 该溶液的pH值至6.96、然后加入蒸馏水定容至100ml，用0.22μm滤器过滤除菌，分装成小份，保存于-20℃。
9．1mol/L CaCl2溶液
【配制方法】在200ml蒸馏水中溶解54g CaCl2?6H2O，用0.22μm滤器过滤除菌，分装成
10ml小份贮存于-20℃。
【注意】制备感受态细胞时，取出一小份解冻并用蒸馏水稀释至100ml，用Nalgene滤器（0.45μm孔径）过滤除菌，然后骤冷至0℃。
10．2.5mol/L CaCl2溶液
【配制方法】在20ml蒸馏水中溶解13.5g CaCl2?6H2O，用0.22μm滤器过滤除菌，分装成1ml小份贮存于-20℃。
11．1mol/L二硫苏糖醇（DTT）溶液
【配制方法】用20ml 0.01mol/L乙酸钠溶液（pH5.2）溶解3.09g DTT，过滤除菌后分装成1ml小份贮存于-20℃。
【注意】DTT或含有DTT的溶液不能进行高压处理。
12．脱氧核苷三磷酸（dNTP）溶液
【配制方法】把每一种dNTP溶解于水至浓度各为100mmol/L左右，用微量移液器吸取0.05mol/l Tris碱分别调节 每一dNTP溶液的pH值7.0（用pH试纸检测），把中和后的每种dNTP溶液各取一份作适当稀释，在给出的波长下读取光密度计算出每种dNTP的实际浓度，然后用水稀释成终浓度为50mmol/L的dNTP，分装成小份贮存于-70℃。
13．0.5mol/l EDTA(pH8.0)溶液
【配制方法】在800ml水中加入186.1g二水乙二胺四乙酸二钠（EDTA-Na?2H2O），在磁力搅拌器上剧烈搅拌，用NaOH调节 溶液的pH值至8.0（约需20g NaOH颗粒）然后定容至1L，分装后高压灭菌备用。
【注意】EDTA二钠盐需加入NaOH将溶液的pH值调至接近8.0，才能完全溶解。
14．溴化乙锭（10mg/ml溶液）
【配制方法】在100ml水中加入1g溴化乙锭，磁力搅拌数小时以确保其完全溶解，然后用铝箔包裹容器或转移至棕色瓶中，保存于室温。
【注意】小心：溴化乙锭是强诱变剂并有中度毒性，使用含有这种染料的溶液时务必戴上手套，称量染料时要戴面罩。
15．2×HEPES缓冲盐溶液
【配制方法】用总量为90ml的蒸馏水溶解1.6g NaCl、0.074g KCl、0.027g Na2PO4?2H2O、0.2g葡聚糖和1gHEPES，用0.5mol/l NaOH调节 pH值至7.05，再用蒸馏水定容至100ml。用0.22μm滤器过滤除菌，分装成5ml小份，贮存于-20℃。
16．IPTG溶液
【配制方法】IPTG为异丙基硫代-β-D-半乳糖苷（分子量为238.3），在8ml蒸馏水中溶解2g IPTG后，用蒸馏水定容至10ml，用0.22μm滤器过滤除菌，分装成1ml小份贮存于-20℃。17．1mol/L乙酸镁溶液
【配制方法】在800ml水中溶解214.46g四水乙酸镁，用水定容至1L过滤除菌。18．1mol/L MgCl2溶液
【配制方法】在800ml水中溶解203.4g MgCl2?6H2O，用水定容至1L，分装成小份并高压灭菌备用。
【注意】MgCl2极易潮解，应选购小瓶（如100g）试剂，启用新瓶后勿长期存放。
19．β-巯基乙醇（BME）溶液
【配制方法】一般得到的是14.4mol/L溶液，应装在棕色瓶中保存于4℃。
【注意】BME或含有BME的溶液不能高压处理。
20．NBT溶液
【配制方法】把0.5g氯化氮蓝四唑溶解于10ml 70%的二甲基甲酰胺中，保存于4℃。
21．酚/氯仿溶液
【配制方法】把酚和氯仿等体积混合后用0.1mol/L Tris?HCl(pH7.6)抽提几次以平衡这一混合物，置棕色玻璃瓶中，上面覆盖等体积的0.01mol/l Tris?HCl(pH7.6)液层，保存于4℃。
【注意】酚腐蚀性很强，并可引起严重灼伤，操作时应戴手套及防护镜，穿防护服。所有操作均应在化学通风橱中进行。与酚接触过的部位皮肤应用大量的水清洗，并用肥皂和水洗涤，忌用乙醇。
22．10mmol/L苯甲基磺酰氟（PMSF）溶液
【配制方法】用异丙醇溶解PMSF成1.74mg/ml（10mmol/L），分装成小份贮存于-20℃。如有必要可配成浓度高达17.4mg/ml的贮存液（100mmol/L）。
【注意】PMSF严重损害呼吸道粘膜、眼睛及皮肤，吸入、吞进或通过皮肤吸收后有致命危险。一旦眼睛或皮肤接触了PMSF，应立即用大量水冲洗之。凡被PMSF污染的衣物应予丢弃。PMSF在水溶液中不稳定。应在使用前从贮存液中现用现加于裂解缓冲液中。PMSF在水溶液中的活性丧失速率随pH值的升高而加快，且25℃的失活速率高于4℃。pH值为8.0时，20μmmol/l PMSF水溶液的半寿期大约为85min，这表明将PMSF溶液调节 为碱性（pH>8.6）并在室温放置数小时后，可安全地予以丢弃。
23．磷酸盐缓冲溶液（PBS）溶液
【配制方法】在800ml蒸馏水中溶解8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,用HCl调节 溶液的pH值至7.4加水定容至1L，在15lbf/in2(1034×105Pa)高压下蒸气灭菌20min。保存于室温。
24．1mol/L乙酸钾（pH7.5）溶液
【配制方法】将9.82g乙酸钾溶解于90ml纯水中，用2mol/L乙酸调节 pH值至7.5后加入纯水定容到1L，保存于-20℃。
25．乙酸钾溶液（用于碱裂解）
【配制方法】在60ml 5mol/L乙酸钾溶液中加入11.5ml冰乙酸和28.5ml水，即成钾浓度为3mol/L而乙酸根浓度为5mol/L的溶液。
26．3mol/L乙酸钠（pH5.2和pH7.0）溶液
【配制方法】在80ml水中溶解408.1g三水乙酸钠，用冰乙酸调节 pH值至5.2或用稀乙酸调节 pH值至7.0，加水定容到1L，分装后高压灭菌。
27．5mol/L NaCl溶液
【配制方法】在800ml水中溶解292.2g NaCl加水定容至1L，分装后高压灭菌。28．10%十二烷基硫酸钠（SDS）溶液
【配制方法】在900ml水中溶解100g电泳级SDS，加热至68℃助溶，加入几滴浓盐酸调节 溶液的pH值至7.2，加水定容至1L，分装备用。
【注意】SDS的微细晶粒易扩散，因此称量时要戴面罩，称量完毕后要清除残留在称量工作区和天平上的SDS，10%SDS溶液无须灭菌。
29．20×SSC溶液
【配制方法】在800ml水中溶解175.3g NaCl和88.2g柠檬酸钠，加入数滴10mol/l NaOH溶液调节 pH值至7.0，加水定容至1L，分装后高压灭菌。
30．20×SSPE溶液
【配制方法】在800ml水中溶解17.5g NaCl、27.6g NaH2PO4?H2O和7.4g EDTA，用NaOH溶液调节 pH值至7.4（约需6.5ml 10ml/L NaOH），加水定容至1L，分装后高压灭菌。31．100%三氯乙酸溶液
【配制方法】在装有500g TCA的瓶中加入227ml水，形成的溶液含有100%（M/V）TCA。32．1mol/L Tris溶液
【配制方法】在800ml水中溶解121.91g Tris碱，加入浓HCl调节 pH值至所需值。应
使溶液冷至室温后方可最后调定pH值，加水定容至1L，分装后高压灭菌。
【注意】如1mol/L溶液呈现黄色，应予丢弃并置备质量更好的Tris。
尽管多种类型的电极均不能准确测量Tris溶液的pH值，但仍可向大多数厂商购得合适的电极。Tris溶液的pH值因温度而异，温度每升高1℃，pH值大约降低0.03个单位。例如：0.05mol/L的溶液在5℃、25℃、和37℃时的pH值分别为9.5、8.9和8.6。
33．Tris缓冲盐溶液（TBS）（25mmol/l Tris）
【配制方法】在800ml蒸馏水中溶解8g NaCl、0.2g KCl和3g Tris碱，加入0.015g酚并用HCl调至pH值至7.4，用蒸馏水定容至1L，分装后在151bf/in2(1.034×105Pa)高压下蒸汽灭菌20min，于室温保存。
34．X-gal溶液
【配制方法】X-gal为5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D半乳糖苷。用二基甲酰胺溶解X-gal配制成的20mg/ml的贮存液。保存于一玻璃管或聚丙烯管中，装有X-gal溶液的试管须用铝箔封裹以防因受光照而被破坏，并应贮存于-20℃。X-gal溶液无须过滤除菌。
配制：
乙二胺四乙酸二钠盐滴定液(0.1mol/L)
称取乙二胺四乙酸二钠盐40g，加热溶于1000ml水中，冷却，摇匀。
乙二胺四乙酸二钠盐滴定液(0.05mol/L)
称取乙二胺四乙酸二钠盐20g，加热溶于1000ml水中，冷却，摇匀。
乙二胺四乙酸二钠盐滴定液(0.02mol/L)
称取乙二胺四乙酸二钠盐8g，加热溶于1000ml水中，冷却，摇匀。标定：
标定：
0.1mol/L乙二胺四乙酸二钠盐溶液，取于约800℃灼烧至恒重的基准氧化锌0.25g±0.0001g，用少量水湿润，加2ml稀盐酸20%使其溶解，加水100ml，用10%氨水调至PH=7～8，加10ml氨—氯化铵（pH=10）及铬黑T指示剂，用配制好的乙二胺四乙酸二钠滴定液(0.1mol/L)滴定至溶液由紫色变为纯蓝色。同时做空白。
C（EDTA）——乙二胺四乙酸二钠盐标准溶液量浓度 mol/L
V1——乙二胺四乙酸二钠盐标准溶液用量 ml
V2——乙二胺四乙酸二钠盐标准溶液用量 ml
0.08138——与1.00ml乙二胺四乙酸二钠盐标准溶液1.000mol/L相当的以克表示的氧化锌的质量
1.几种常用溶液浓度的表示法
（1）质量百分比浓度：用溶质的质量占全部溶液质量的百分比来表示的浓度。简称百分浓度。
（2）体积百分比浓度：用溶质的质量占溶剂体积的百分比来表示的浓度。在工农业生产中常用这种浓度。
（3）体积比浓度：液体试剂相互混和或液体试剂用水稀释时常用此法。
例如，1∶3酒精溶液指的是1体积的酒精和3体积的蒸馏水混和而成的酒精水溶液，1∶3中的前一个数字指的是溶质的体积数，后一个数字指的是溶剂的体积数。
（4）物质的量浓度：用1升溶液里含有溶质的量来表示的溶液浓度。目前习惯称摩尔浓度，用M表示。
（5）当量浓度：用每升溶液里所含溶质的克当量数表示的浓度。通常用N表示。
2.常用酸碱溶液的配制
表4-12常用酸碱溶液的配制
3.常用盐溶液的配制
表4-13常用盐溶液的配制
续表
常用溶液的配制
1．0.5mol/l EDTA(pH8.0)溶液
【配制方法】在800ml水中加入186.1g二水乙二胺四乙酸二钠（EDTA-Na?2H2O），在磁力搅拌器上剧烈搅拌，用NaOH调节 溶液的pH值至8.0（约需20g NaOH颗粒）然后定容至1L，分装后高压灭菌备用。
【注意】EDTA二钠盐需加入NaOH将溶液的pH值调至接近8.0，才能完全溶解。 0. 1mol/l EDTA(pH8.0)溶液
【配制方法】在800ml水中加入37.224g二水乙二胺四乙酸二钠（EDTA-Na?2H2O），在磁力搅拌器上剧烈搅拌，用2当量NaOH调节 溶液的pH值至8.0然后定容至1L。
使用时稀释一百倍变成1mMol/l EDTA工作液。PH值调至8
2．磷酸盐缓冲溶液（PBS）溶液
【配制方法】在800ml蒸馏水中溶解8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,用HCl调节 溶液的pH值至7.4加水定容至1L，在15lbf/in2(1034×105Pa)高压下蒸气灭菌20min。保存于室温。
3．Tris缓冲盐溶液（TBS）（25mmol/l Tris）
【配制方法】在800ml蒸馏水中溶解8g NaCl、0.2g KCl和3g Tris碱，加入0.015g酚并用HCl调至pH值至7.4，用蒸馏水定容至1L，分装后在151bf/in2(1.034×105Pa)高压下蒸汽灭菌20min，于室温保存。
Tris缓冲盐溶液（TBS）（50mmol/l Tris PH7.6）
Tris缓冲盐溶液（TBS）（50mmol/l Tris）
【配制方法】称取Tris（三羟甲基氨基甲烷）6.057g，加少许双蒸水溶解后加1HCL42ml,Nacl
8.5g,最后加双蒸水至1000ml,用1N HCL或NAOH调至7.6,充分摇匀,4℃保存
4当量当量表示元素或化合物相互作用时的重量比的数值
1mol/L的H2SO4,如果换成当量浓度就应该是2N H2SO4，大概的意思就是1mol的H2SO4会有2mol的氢离子，类似的1mol/L的HCL就是1N，1mol/L的NAOH就是1N，1mol/L的CA(OH)2就是2N,这是酸碱的。如果是氧化物或是还原物就看能得失的电子数，比如说1mol/L的K2Cr2O7的当量浓度就应该是6N,1mol/L的KMnO4的当量浓度是5N。如果是盐类，就看能与酸或碱结合所要的H+或OH-数量，比如说NA2CO3的就是2，NAHCO3是1
1当量HCL配制：用量筒量取8.3ml配成100ml溶液。
1当量NaOH配制：称取NaOH 4g 配成100ml溶液。
1当量硫酸溶液：量取分析纯硫酸（比重1.83）28毫升，慢慢注入
500 毫升水中，冷却后稀释到1升。
0.1当量硫酸溶液：量取分析纯硫酸2.8毫升，溶解于500毫升水中，冷却后稀释到1升。
配制培养基有两种方法可以选择，一是购买培养基中所有化学药品，按照需要自己配制；二是购买商品的混合好的培养基基本成分粉剂，如MS、B5等。
自己配制可以节约费用，但浪费时间、人力、且有时由于药品的质量问题，给实验带来麻烦。就目前国内的情况看，大部分还是自己配制。为了方便起见，现以MS培养基为例介绍配置培养基的主要过程。
1、配制几种母液
（1）配制MS大量元素母液
一般将大量元素分别配制成100倍的母液，使用时再分别稀释100倍。
分别称取
NH4NO3 165g KH2PO4 17g
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