实验室常用溶液配制

篇一：实验室常用试剂配制

实验室常用溶液及试剂配制

实验室常用溶液、试剂的配制

表一 普通酸碱溶液的配制

表二常用酸碱指示剂

表三混合酸碱指示剂

表四容量分析基准物质的干燥

表五缓冲溶液的配制 1、 氯化钾-盐酸缓冲溶液

2、 邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钾缓冲溶液

3、 邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钾缓冲溶液

4、 乙酸-乙酸钠缓冲溶液

5、 磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲溶液

6、 硼砂-氢氧化钠缓冲溶液

7、 氨水-氯化铵缓冲溶液

8、 常用缓冲溶液的配制

篇二：实验室常用溶液的配制

实验室常用溶液的配制

1．30%丙烯酰胺溶液（100ml）

【配制方法】将29g丙烯酰胺和1g N,N'-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为60ml的蒸馏水中。加热至37℃溶解之，补加水至终体积为100ml。用Nalgene滤器（0.45μm孔径）过滤除菌，查证该溶液的pH值应不大于7.0，置棕色瓶中保存于4℃温度。

【注意】丙烯酰胺具有很强的神经毒性并可以通过皮肤吸收，其作用具累积性。称量丙烯酰胺和亚甲双丙烯酰胺时应戴手套和面具。可认为聚丙烯酰胺无毒，但也应谨慎操作，因为它还可能会含有少量未聚合材料。一些价格较低的丙烯酰胺和双丙烯酰胺通常含有一些金属离子，在丙烯酰胺贮存液中加入大约0.2体积的单床混合树脂（MB-1Mallinckrodt），搅拌过夜，然后用Whatman 1号滤纸过滤以纯化之。在贮存期间，丙烯酰胺和双丙烯酰胺会缓慢转化成丙烯酰和双丙烯酸，因此大于1年的溶液应该被丢弃。

2．40%丙烯酰胺（用于DNA测序，1L）

【配制方法】把380g丙烯酰胺（DNA测序级）和20g N,N'-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为600ml的蒸馏水中。继续按上述配制30%丙烯酰胺溶液的方法处理，但加热溶解后应以蒸馏水补足 至终体积为1L。置棕色瓶中保存于室温。

【注意】见上述配制30%丙烯酰胺的说明，40%丙烯酰胺溶液用于DNA序列测定。 3．0.1mol/L腺苷三磷酸（ATP）溶液（1ml）

【配制方法】在0.8ml蒸馏水中溶解60mg ATP，用0.1mol/L NaOH调至pH值至7.0，用蒸馏水稀释1ml

【注意】分装成小份保存于-70℃

4．10mol/L乙酸铵溶液（1L）

【配制方法】把770g乙酸铵溶解于800ml蒸馏水中，加水稀释至1L后过滤除菌。在4°C储存。

【注意】乙酸铵是热不稳定的。不要高压灭菌。

5．10%过硫酸铵溶液（10ml）

【配制方法】把1g过硫酸铵溶于8ml蒸馏水中，用蒸馏水补足体积至10ml。该溶液可在4℃保存数周。

6．1mol/L CaCl2溶液（200ml）

【配制方法】称取54g CaCl2·6H2O并溶解在170ml蒸馏水中，用蒸馏水补足体积至200 ml。用0.22μm滤器过滤除菌，分装成10ml小份贮存于-20℃。

【用法】制备感受态细胞时，将等分试样解冻，用蒸馏水稀释至100ml。通过Nalgene过滤器（0.45微米）过滤除菌，并在使用前冷却至0℃。

7．2.5mol/L CaCl2溶液（20ml）

【配制方法】称取13.5g CaCl2·6H2O并溶于15ml蒸馏水中，用蒸馏水补足体积至20ml。用0.22μm滤器过滤除菌，分装成1ml小份贮存于-20℃。

8．脱氧核苷三磷酸（dNTPs）溶液

【配制方法】把每一种dNTP溶解于水至浓度各为100mmol/L左右，用微量移液器吸取0.05mol/l Tris碱分别调节每一dNTP溶液的pH值7.0（用pH试纸检测），把中和后的每种

dNTP的实际浓度。

计算每个dNTP的实际浓度。对于路径长度为1cm的比色皿，吸光度等于消光系数和摩尔浓度的乘积。

然后用蒸馏水稀释成终浓度为50mmol/L的dNTP，分别分装成小份贮存于-70℃。

9．1mol/L二硫苏糖醇（DTT）溶液（20ml）

【配制方法】称取3.09g DTT，溶于15ml蒸馏水中，用0.01mol/L乙酸钠溶液（pH5.2）补足体积至20ml。通过0.22微米过滤器过滤除菌后分装成1ml小份贮存于-20℃。

【注意】不要对DTT或含有DTT的溶液进行高压灭菌。

10．0.5mol/l EDTA(pH8.0)溶液（1L）

【配制方法】在800ml蒸馏水中加入186.1gNa2EDTA·2H2O，在磁力搅拌器上剧烈搅拌，用NaOH调节溶液的pH值至8.0（约需20g NaOH颗粒），然后稀释至1L，分装后高压灭菌备用。在室温下保存。

【注意】EDTA二钠盐不溶于水，需加入NaOH将溶液的pH值调至接近8.0，才能完全溶解。 分配适当的等分试样并通过高压灭菌消毒。

11．溴化乙锭（10mg/ml溶液）（100ml）

【配制方法】在100ml水中加入1g溴化乙锭，磁力搅拌数小时以确保其完全溶解，然后用铝箔包裹容器或转移至棕色瓶中，保存于4°C。

【注意】小心：溴化乙锭是强诱变剂并有中度毒性，使用含有这种染料的溶液时务必戴上手套，称量染料时要戴面罩。使用后，这些溶液应进行净化。有关如何执行此操作的详细信息，请参阅机构指南。

12．2×HEPES缓冲盐溶液（100ml）

【配制方法】用90ml的蒸馏水溶解1.6g NaCl、0.074g KCl、0.027g Na2PO4·2H2O、0.2g葡萄糖和1gHEPES，用0.5mol/l NaOH调节pH值至7.05，再用蒸馏水稀释至100ml。用0.22μm滤器过滤除菌，分装成5ml小份，贮存于-20℃。

13．1mol/l异丙硫基-β-D-半乳糖苷IPTG溶液（10ml）

【配制方法】IPTG（分子量为238.3），在8ml蒸馏水中溶解2g IPTG后，用蒸馏水稀释至10ml，用0.22μm一次性滤器过滤除菌，分装成1ml小份贮存于-20℃。

14．1mol/L乙酸镁（MgOAc）溶液（1升）

【配制方法】在800ml蒸馏水中溶解214.46g四水乙酸镁，稀释至1L过滤除菌。在室温下保存。

15．1mol/L MgCl2溶液（1升）

【配制方法】在800ml蒸馏水中溶解203.4g MgCl2·6H2O，用水稀释至1L，分装成小份并高压灭菌备用。在室温下保存。

【注意】MgCl2极易潮解，应选购小瓶（如100g）试剂，启用新瓶后勿长期存放。

16．酚/氯仿溶液

【配制方法】把酚和氯仿等体积混合后用0.1mol/L Tris·HCl(pH7.6)萃取几次以平衡这一混合物，置棕色玻璃瓶中，上面覆盖等体积的0.01mol/l Tris·HCl(pH7.6)液层，保存于4℃。

【注意】酚腐蚀性很强，并可引起严重灼伤，操作时应戴手套及防护镜，穿防护服。所有操作均应在化学通风橱中进行。与酚接触过的部位皮肤应用大量的水清洗，并用肥皂和水洗涤，忌用乙醇。

17．10mmol/L苯甲基磺酰氟（PMSF）溶液（10ml）

【配制方法】用10ml异丙醇溶解PMSF成1.74mg，分装成小份贮存于-20℃。如有必要可配成浓度高达17.4mg/ml的贮存液（100mmol/L）。

【注意】PMSF严重损害呼吸道粘膜、眼睛及皮肤，吸入、吞进或通过皮肤吸收后有致命危险。一旦眼睛或皮肤接触了PMSF，应立即用大量水冲洗之。凡被PMSF污染的衣物应予丢

弃。PMSF的水溶液在其已经变为碱性（pH> 8.6）并在室温下储存几小时后可以安全地丢弃。 （PMSF在水溶液中的活性丧失速率随pH值的升高而加快，且25℃的失活速率高于4℃。pH值为8.0时，20μmmol/l PMSF水溶液的半寿期大约为35min。）

18．1mol/L乙酸钾（pH7.5）溶液（100ml）

【配制方法】将9.82g乙酸钾溶解于90ml蒸馏水中，用2mol/L乙酸调节pH值至7.5后稀释到100ml，分装成小份后保存于-20℃。

19．3mol/L乙酸钠（pH7.0）溶液（1升）

【配制方法】在800ml蒸馏水中溶解408.1g三水乙酸钠，用冰乙酸调节pH值至5.2，稀释到1L，分装后高压灭菌。在室温下保存。

20．3mol/L乙酸钠（pH5.2）溶液（1升）

【配制方法】在800ml蒸馏水中溶解408.1g三水乙酸钠，用冰乙酸调节pH值至7.0，稀释到1L，分装后高压灭菌。在室温下保存。

21．5mol/L NaCl溶液（1升）

【配制方法】在800ml蒸馏水中溶解292.2g NaCl加水稀释至1L，分装后高压灭菌。在室温下保存

22．10%十二烷基硫酸钠（SDS）溶液（1升）

【配制方法】在900ml蒸馏水中溶解100g电泳级SDS，加热至68℃溶溶，加入几滴浓盐酸调节溶液的pH值至7.2，加水稀释至1L，分装备用。在室温下保存。

【注意】SDS的微细晶粒易扩散，因此称量时要戴面罩，称量完毕后要清除残留在称量工作区和天平上的SDS。10%SDS溶液无须灭菌。

23．20×SSC（NaCl和柠檬酸钠）溶液（1升）

【配制方法】在800ml蒸馏水中溶解175.3g NaCl和88.2g柠檬酸钠，加入数滴10mol/l NaOH溶液调节pH值至7.0，加水稀释至1L，分装后高压灭菌。在室温下保存。

24．20×SSPE溶液（盐，磷酸钠，EDTA）（1升）

【配制方法】在800ml毫升水中溶解175.3g NaCl，31.2g NaH2PO4·2H2O和7.4g EDTA，用NaOH溶液调节pH值至7.4（约需6.5ml 10ml/L NaOH），加水稀释至1L，分装后高压灭菌。在室温下保存。

25．100%三氯乙酸（TCA）溶液（500g TCA）

【配制方法】在装有500g TCA的瓶中加入227ml蒸馏水，形成的溶液含有100%（M/V）TCA。在室温下保存。

26．1mol/L Tris溶液（1升）

【配制方法】在800ml蒸馏水中溶解121.91g Tris碱，加入浓HCl调节pH值至所需值。对于pH 7.4，加入70ml HCl; 对于pH为7.6加入60ml HCl; 对于8.0的pH，加入42ml HCl。加水稀释至1L，分装后高压灭菌。在室温下保存。

【注意】如1mol/L溶液呈现黄色，应予丢弃并置备质量更好的Tris。

尽管多种类型的电极均不能准确测量Tris溶液的pH值，但仍可向大多数厂商购得合适的电极。Tris溶液的pH值因温度而异，温度每升高1℃，pH值大约降低0.03个单位，应使溶液冷至室温后方可最后调定pH值。例如：0.05mol/L的溶液在5℃、25℃、和37℃时的pH值分别为9.5、8.9和8.6。

27．Tris缓冲盐溶液（TBS）（25mmol/l Tris）（1升）

【配制方法】在800ml蒸馏水中溶解8g NaCl、0.2g KCl和3g Tris碱，加入0.015g酚并用HCl调至pH值至7.4，用蒸馏水稀释至1L，分装后高压灭菌（15lb in-2液体循环中20min），于室温保存。

28．电泳用Tris-乙酸（TAE）（50X）（1升）

【配制方法】称重242g Tris碱,加入800毫升蒸馏水溶解。加入57.1ml冰醋酸和100ml 0.5mol/lEDTA（pH8.0），用蒸馏水补足体积至1升。在室温下保存。

【用法】用蒸馏水稀释1:49。TAE具有相当低的缓冲能力，并且在延伸电泳期间倾向于耗尽。因此，当在高电流下长时间进行电泳时，建议更换缓冲液或两个储存器之间的再循环。

篇三：实验室常用溶液配制

常用溶液的配制

1 细菌培养相关溶液

1） LB培养基：

胰蛋白胨10g 酵母提取物5g NaCl 10g

5M NaOH调PH至7.0 加去离子水至1000ml 高压灭菌

2） 氨苄青霉素：1g溶于10ml水中,使用时1:1000

稀释

卡那霉素：1g溶于20ml水中，使用时1:1000稀释。

2 细胞培养相关溶液

1) DMEM培养基：

DMEM干粉（Gibco）1袋 加入适量去离子水中

NaHCO3 3.7g HEPES 3g 搅拌溶解

1M HCl或1M NaOH调节PH至7.0-7.2 定容至1000ml，

0.22μm的微孔滤膜过滤除菌。 2) 1640培养基：

1640干粉（Gibco）1袋 加入适量去离子水 NaHCO3 2g

HEPES 3g 搅拌溶解

1M HCl或1M NaOH调节PH至7.0-7.2 加入去离子水至1000ml 用0.22μm的微孔滤膜过滤除菌

3) 胰蛋白酶液（0.25%Trypsin-0.04%EDTA消化液）： Trypsin 1.25g EDTA 0.2g NaCl 3.5g

Na2HPO4?12H2O 0.15g KH2PO4 0.12g Tris 1.5g KCl 0.185g D-葡萄糖 0.5g 酚红 0.005g 加去离子水溶解 定容至500ml

0.22μm的微孔滤膜过滤除菌 4) 1x PBS(1L) ： NaCl 8g KCl 0.2g

Na2HPO4?12H2O 1.44g K2HPO4 0.24g 加蒸馏水800ml 盐酸调PH至7.4 加水定容至1000ml

3 Western-blot 相关试剂

1） 30%丙烯酰胺溶液：

丙烯酰胺29g

N,N-亚甲双丙烯酰胺1g 加入适量去离子水充分溶解

定容至100ml(不高压) （至少搅拌半小时）普通滤纸过滤

避光、室温贮存于棕色瓶中 2） 1.5M Tris-Cl(PH8.8)：

Tris碱18.15g 去离子水80ml 浓盐酸调PH值8.8 加去离子水定容至100ml

3） 1.0M Tris-Cl(PH6.8)：

Tris碱12.1g 去离子水80ml， 浓盐酸调PH至6.8 加去离子水定容至100ml 1.0M Tris Cl

用800ml 蒸馏水溶解121.1g Tris 碱，加浓盐酸调Ph

pH：7.4HCl：70ml

7.6 60ml 8.0

42ml

应使溶液冷却至室温后 调pH

加水定容至1L分装 高压灭菌

如果1mol/L 溶液呈现黄色 应丢弃 4） 10%（m/v）过硫酸胺：

过硫酸胺0.1g溶于1ml去离子水中，现用现配。或者：贮存于4度 5） 10%SDS：

在180ml水中溶解 20g电泳级SDS 加热至68℃助溶 浓盐酸调PH值至7.2 加水定容至200ml。

6） Tris-甘氨酸电泳缓冲液（5×）：

Tris碱15.1g 甘氨酸94g SDS 5g 加去离子水溶解 定容至1000ml

7） 2×SDS-PAGE凝胶电泳上样缓冲液：

Tris碱0.6g DTT 1.54g SDS 2g 溴酚蓝0.1g 甘油10ml

加适量去离子水混匀 定容至50ml

2x SDS Loading buffer 2ml 1M Tris(Ph6.8)

4ml 20% SDS 8ml 50% glycerol 4mg BPB(溴酚蓝) 2ml H2O

共16ml 用时取0.8ml 此母液 加入0.2ml 1M DTT 和蛋白酶抑制剂

10x SDS Running buffer 1L：144g glycine 30.25g Tris

10g SDS 加水定容至1L 8） 电转移缓冲液：

甘氨酸2.9g Tris碱5.8g SDS 0.37g 甲醇200ml

加去离子水定容至1000ml 10x Western转移缓冲液 29g 甘氨酸 58g Tris 18.5ml 20% SDS 补水至800ml（不高压）

用时每80ml稀释10倍 另补加200ml甲醇 9） 甲醇/醋酸脱色液：

甲醇450ml 冰醋酸100ml

加去离子水定容至1000m

考马斯亮蓝（commassise bright blue R250）染液：

考马斯亮蓝0.25g

溶于100ml甲醇/醋酸脱色液中（搅拌半小时以上）

或者：考马斯亮蓝染液： 45ml 水 45ml 甲醇 10ml 冰乙酸

0.25g 考马斯亮蓝R250 搅拌半小时以上 普通滤纸过滤 Whatman 1号滤纸过滤

10） 1x TBS-T（0.05%Tween-20）： Tris碱2.42g NaCl 8g 去离子水800ml

盐酸调PH值至7.6（浓盐酸约12ml） 加0.5ml 的Tween-20 加水定容至1000ml。

11） 封闭液：

TBS-T（0.05%Tween-20）中加入5%新鲜

脱脂奶粉，现用现配

100ml TBST(1x)加入5g奶粉

4细胞总蛋白提取相关溶液

1） 蛋白酶抑制剂母液：

100mM PMSF（以异丙醇溶解） 10mg/ml leupeptin(去离子水溶解)

1mg/ml aprotinin(0.01M HEPES[PH8.0]溶解) 2） RIPA细胞裂解液：

用PBS配制

加入1%NP40，0.5%脱氧胆酸钠 0.1%SDS

临用前加入蛋白酶抑制剂（1mM PMSF；1μg/ml leupeptin；2μg/ml aprotinin）

5 EMSA相关溶液

1） 4%非变性聚丙烯酰胺凝胶：

10×TBE 1ml

37.5:1丙烯酰胺 1.25ml 40%丙烯酰胺0.75ml 80%甘油0.625ml 去离子水16.2ml 10%过硫酸铵150μl TEMED 10μl； 2） 37.5:1丙烯酰胺溶液：

丙烯酰胺37.5g 甲叉双丙烯酰胺1g 加去离子水定容至100ml 3） 5×结合液：

MgCl2 5mM NaCl 0.25M DTT2.5mM EDTA 2.5mM 20%甘油

Tris-Cl 50mM (PH7.5) 0.25mg/ml poly(dI-dC) 4） 10×上样缓冲液：

Tris-Cl 250mM (PH7.5) 0.2%溴酚蓝 40%甘油

6核蛋白提取相关溶液

1） Buffer A：

Hepes 10mM(PH7.8) MgCl2 5mM KCl 10mM DTT 1mM PMSF 0.5mM

临用前加1mM的NaF和Na3VO4； 2） Buffer C：

Hepes 20mM MgCl2 5mM NaCl 0.5M DTT 1mM PMSF 0.5mM EDTA 0.1mM 20%甘油。

裂解缓冲液 Lysis buffer （IP用，表达也可用）：Hepes(pH7.2) 2.4g Nacl 1.5g TritonX-100 1.5ml NaF (1M) 0.5ml

加水至500ml（调pH7.2） 用前补加：DDT至1mM Na3VO4至1mM 蛋白酶抑制剂

《实验室常用溶液配制》由：免费论文网互联网用户整理提供；
链接地址：http://www.csmayi.cn/meiwen/16229.html
转载请保留,谢谢!

• 上一篇：很吵的歌
• 下一篇：同学聚会照片ppt