实验室溶液配制记录

篇一：实验室常用溶液的配制

实验室常用溶液的配制

1．30%丙烯酰胺溶液（100ml）

【配制方法】将29g丙烯酰胺和1g N,N'-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为60ml的蒸馏水中。加热至37℃溶解之，补加水至终体积为100ml。用Nalgene滤器（0.45μm孔径）过滤除菌，查证该溶液的pH值应不大于7.0，置棕色瓶中保存于4℃温度。

【注意】丙烯酰胺具有很强的神经毒性并可以通过皮肤吸收，其作用具累积性。称量丙烯酰胺和亚甲双丙烯酰胺时应戴手套和面具。可认为聚丙烯酰胺无毒，但也应谨慎操作，因为它还可能会含有少量未聚合材料。一些价格较低的丙烯酰胺和双丙烯酰胺通常含有一些金属离子，在丙烯酰胺贮存液中加入大约0.2体积的单床混合树脂（MB-1Mallinckrodt），搅拌过夜，然后用Whatman 1号滤纸过滤以纯化之。在贮存期间，丙烯酰胺和双丙烯酰胺会缓慢转化成丙烯酰和双丙烯酸，因此大于1年的溶液应该被丢弃。

2．40%丙烯酰胺（用于DNA测序，1L）

【配制方法】把380g丙烯酰胺（DNA测序级）和20g N,N'-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为600ml的蒸馏水中。继续按上述配制30%丙烯酰胺溶液的方法处理，但加热溶解后应以蒸馏水补足 至终体积为1L。置棕色瓶中保存于室温。

【注意】见上述配制30%丙烯酰胺的说明，40%丙烯酰胺溶液用于DNA序列测定。 3．0.1mol/L腺苷三磷酸（ATP）溶液（1ml）

【配制方法】在0.8ml蒸馏水中溶解60mg ATP，用0.1mol/L NaOH调至pH值至7.0，用蒸馏水稀释1ml

【注意】分装成小份保存于-70℃

4．10mol/L乙酸铵溶液（1L）

【配制方法】把770g乙酸铵溶解于800ml蒸馏水中，加水稀释至1L后过滤除菌。在4°C储存。

【注意】乙酸铵是热不稳定的。不要高压灭菌。

5．10%过硫酸铵溶液（10ml）

【配制方法】把1g过硫酸铵溶于8ml蒸馏水中，用蒸馏水补足体积至10ml。该溶液可在4℃保存数周。

6．1mol/L CaCl2溶液（200ml）

【配制方法】称取54g CaCl2·6H2O并溶解在170ml蒸馏水中，用蒸馏水补足体积至200 ml。用0.22μm滤器过滤除菌，分装成10ml小份贮存于-20℃。

【用法】制备感受态细胞时，将等分试样解冻，用蒸馏水稀释至100ml。通过Nalgene过滤器（0.45微米）过滤除菌，并在使用前冷却至0℃。

7．2.5mol/L CaCl2溶液（20ml）

【配制方法】称取13.5g CaCl2·6H2O并溶于15ml蒸馏水中，用蒸馏水补足体积至20ml。用0.22μm滤器过滤除菌，分装成1ml小份贮存于-20℃。

8．脱氧核苷三磷酸（dNTPs）溶液

【配制方法】把每一种dNTP溶解于水至浓度各为100mmol/L左右，用微量移液器吸取0.05mol/l Tris碱分别调节每一dNTP溶液的pH值7.0（用pH试纸检测），把中和后的每种

dNTP的实际浓度。

计算每个dNTP的实际浓度。对于路径长度为1cm的比色皿，吸光度等于消光系数和摩尔浓度的乘积。

然后用蒸馏水稀释成终浓度为50mmol/L的dNTP，分别分装成小份贮存于-70℃。

9．1mol/L二硫苏糖醇（DTT）溶液（20ml）

【配制方法】称取3.09g DTT，溶于15ml蒸馏水中，用0.01mol/L乙酸钠溶液（pH5.2）补足体积至20ml。通过0.22微米过滤器过滤除菌后分装成1ml小份贮存于-20℃。

【注意】不要对DTT或含有DTT的溶液进行高压灭菌。

10．0.5mol/l EDTA(pH8.0)溶液（1L）

【配制方法】在800ml蒸馏水中加入186.1gNa2EDTA·2H2O，在磁力搅拌器上剧烈搅拌，用NaOH调节溶液的pH值至8.0（约需20g NaOH颗粒），然后稀释至1L，分装后高压灭菌备用。在室温下保存。

【注意】EDTA二钠盐不溶于水，需加入NaOH将溶液的pH值调至接近8.0，才能完全溶解。 分配适当的等分试样并通过高压灭菌消毒。

11．溴化乙锭（10mg/ml溶液）（100ml）

【配制方法】在100ml水中加入1g溴化乙锭，磁力搅拌数小时以确保其完全溶解，然后用铝箔包裹容器或转移至棕色瓶中，保存于4°C。

【注意】小心：溴化乙锭是强诱变剂并有中度毒性，使用含有这种染料的溶液时务必戴上手套，称量染料时要戴面罩。使用后，这些溶液应进行净化。有关如何执行此操作的详细信息，请参阅机构指南。

12．2×HEPES缓冲盐溶液（100ml）

【配制方法】用90ml的蒸馏水溶解1.6g NaCl、0.074g KCl、0.027g Na2PO4·2H2O、0.2g葡萄糖和1gHEPES，用0.5mol/l NaOH调节pH值至7.05，再用蒸馏水稀释至100ml。用0.22μm滤器过滤除菌，分装成5ml小份，贮存于-20℃。

13．1mol/l异丙硫基-β-D-半乳糖苷IPTG溶液（10ml）

【配制方法】IPTG（分子量为238.3），在8ml蒸馏水中溶解2g IPTG后，用蒸馏水稀释至10ml，用0.22μm一次性滤器过滤除菌，分装成1ml小份贮存于-20℃。

14．1mol/L乙酸镁（MgOAc）溶液（1升）

【配制方法】在800ml蒸馏水中溶解214.46g四水乙酸镁，稀释至1L过滤除菌。在室温下保存。

15．1mol/L MgCl2溶液（1升）

【配制方法】在800ml蒸馏水中溶解203.4g MgCl2·6H2O，用水稀释至1L，分装成小份并高压灭菌备用。在室温下保存。

【注意】MgCl2极易潮解，应选购小瓶（如100g）试剂，启用新瓶后勿长期存放。

16．酚/氯仿溶液

【配制方法】把酚和氯仿等体积混合后用0.1mol/L Tris·HCl(pH7.6)萃取几次以平衡这一混合物，置棕色玻璃瓶中，上面覆盖等体积的0.01mol/l Tris·HCl(pH7.6)液层，保存于4℃。

【注意】酚腐蚀性很强，并可引起严重灼伤，操作时应戴手套及防护镜，穿防护服。所有操作均应在化学通风橱中进行。与酚接触过的部位皮肤应用大量的水清洗，并用肥皂和水洗涤，忌用乙醇。

17．10mmol/L苯甲基磺酰氟（PMSF）溶液（10ml）

【配制方法】用10ml异丙醇溶解PMSF成1.74mg，分装成小份贮存于-20℃。如有必要可配成浓度高达17.4mg/ml的贮存液（100mmol/L）。

【注意】PMSF严重损害呼吸道粘膜、眼睛及皮肤，吸入、吞进或通过皮肤吸收后有致命危险。一旦眼睛或皮肤接触了PMSF，应立即用大量水冲洗之。凡被PMSF污染的衣物应予丢

弃。PMSF的水溶液在其已经变为碱性（pH> 8.6）并在室温下储存几小时后可以安全地丢弃。 （PMSF在水溶液中的活性丧失速率随pH值的升高而加快，且25℃的失活速率高于4℃。pH值为8.0时，20μmmol/l PMSF水溶液的半寿期大约为35min。）

18．1mol/L乙酸钾（pH7.5）溶液（100ml）

【配制方法】将9.82g乙酸钾溶解于90ml蒸馏水中，用2mol/L乙酸调节pH值至7.5后稀释到100ml，分装成小份后保存于-20℃。

19．3mol/L乙酸钠（pH7.0）溶液（1升）

【配制方法】在800ml蒸馏水中溶解408.1g三水乙酸钠，用冰乙酸调节pH值至5.2，稀释到1L，分装后高压灭菌。在室温下保存。

20．3mol/L乙酸钠（pH5.2）溶液（1升）

【配制方法】在800ml蒸馏水中溶解408.1g三水乙酸钠，用冰乙酸调节pH值至7.0，稀释到1L，分装后高压灭菌。在室温下保存。

21．5mol/L NaCl溶液（1升）

【配制方法】在800ml蒸馏水中溶解292.2g NaCl加水稀释至1L，分装后高压灭菌。在室温下保存

22．10%十二烷基硫酸钠（SDS）溶液（1升）

【配制方法】在900ml蒸馏水中溶解100g电泳级SDS，加热至68℃溶溶，加入几滴浓盐酸调节溶液的pH值至7.2，加水稀释至1L，分装备用。在室温下保存。

【注意】SDS的微细晶粒易扩散，因此称量时要戴面罩，称量完毕后要清除残留在称量工作区和天平上的SDS。10%SDS溶液无须灭菌。

23．20×SSC（NaCl和柠檬酸钠）溶液（1升）

【配制方法】在800ml蒸馏水中溶解175.3g NaCl和88.2g柠檬酸钠，加入数滴10mol/l NaOH溶液调节pH值至7.0，加水稀释至1L，分装后高压灭菌。在室温下保存。

24．20×SSPE溶液（盐，磷酸钠，EDTA）（1升）

【配制方法】在800ml毫升水中溶解175.3g NaCl，31.2g NaH2PO4·2H2O和7.4g EDTA，用NaOH溶液调节pH值至7.4（约需6.5ml 10ml/L NaOH），加水稀释至1L，分装后高压灭菌。在室温下保存。

25．100%三氯乙酸（TCA）溶液（500g TCA）

【配制方法】在装有500g TCA的瓶中加入227ml蒸馏水，形成的溶液含有100%（M/V）TCA。在室温下保存。

26．1mol/L Tris溶液（1升）

【配制方法】在800ml蒸馏水中溶解121.91g Tris碱，加入浓HCl调节pH值至所需值。对于pH 7.4，加入70ml HCl; 对于pH为7.6加入60ml HCl; 对于8.0的pH，加入42ml HCl。加水稀释至1L，分装后高压灭菌。在室温下保存。

【注意】如1mol/L溶液呈现黄色，应予丢弃并置备质量更好的Tris。

尽管多种类型的电极均不能准确测量Tris溶液的pH值，但仍可向大多数厂商购得合适的电极。Tris溶液的pH值因温度而异，温度每升高1℃，pH值大约降低0.03个单位，应使溶液冷至室温后方可最后调定pH值。例如：0.05mol/L的溶液在5℃、25℃、和37℃时的pH值分别为9.5、8.9和8.6。

27．Tris缓冲盐溶液（TBS）（25mmol/l Tris）（1升）

【配制方法】在800ml蒸馏水中溶解8g NaCl、0.2g KCl和3g Tris碱，加入0.015g酚并用HCl调至pH值至7.4，用蒸馏水稀释至1L，分装后高压灭菌（15lb in-2液体循环中20min），于室温保存。

28．电泳用Tris-乙酸（TAE）（50X）（1升）

【配制方法】称重242g Tris碱,加入800毫升蒸馏水溶解。加入57.1ml冰醋酸和100ml 0.5mol/lEDTA（pH8.0），用蒸馏水补足体积至1升。在室温下保存。

【用法】用蒸馏水稀释1:49。TAE具有相当低的缓冲能力，并且在延伸电泳期间倾向于耗尽。因此，当在高电流下长时间进行电泳时，建议更换缓冲液或两个储存器之间的再循环。

篇二：实验室常用溶液及溶剂的配制

实验室常用溶液及试剂配制

表一 普通酸碱溶液的配制

表二常用酸碱指示剂

表三混合酸碱指示剂

表四容量分析基准物质的干燥

表五缓冲溶液的配制

实验室常用试验方法2

九、柠檬酸（C6H8O7·H2O）

称取试样1.5g（精确到0.0002g）于三角瓶内，加入水50ml溶解，加酚酞指示剂3滴，用1mol/L氢氧化钠标准溶液滴定至粉红色为终点，同时做空白试验。 计算：X%（一水）= （V1-V0）×C×0.06404x m×（1-0.08566）×100

X%（无水）= （V1-V0）×C×0.06404x m×100 V1-----消耗氢氧化钠标准溶液的体积，ml；

V0-----空白所消耗氢氧化钠标准溶液的体积，ml； C------氢氧化钠标准溶液浓度，mol/L； m---样品质量。

十、钙含量测定（磷酸氢钙CaHPO4、磷酸二氢钙Ca（H2PO4）2·H2O、钙粉等）

称取2g（精确到0.0002g）样品，用10ml盐酸（1+1）溶解，转移至100ml容量瓶中定溶，用移液管吸取10ml于250ml锥形瓶中，加50ml水，5ml蔗糖溶液（25g/L），2ml三乙酸胺（1+1），1ml乙二胺（1+1），1滴孔雀绿指示液（1g/L），滴加氢氧化钾溶液（200g/L）至无色，再过量10ml，加0.1g盐酸羟胺（每加一种试剂都要摇匀），加钙黄绿素少许，在黑色背景下用0.05mol/L的EDTA标准溶液滴定至绿色荧光消失呈现紫红色为滴定终点。 Ca%= C×V×0.4008x m ×100

C------EDTA标准溶液的浓度，mol/L； V-----消耗EDTA标准溶液的体积，ml； m----样品质量。

（二）氟（Fˉ）含量的测定： 1、标准曲线的绘制； 2、试样含量的测定：

称取0.5g（精确到0.0002g）置于50ml纳氏比色管中，加1mol/L盐酸10ml，密闭提取1h（不时摇动），避免粘于管壁，提取后加总离子强度缓冲液25ml，加水至刻度，以滤纸过滤。以氟电极测平衡电位值。

结果计算：X= C×50×1000 x m×1000 = 50C x m X-----试样中氟含量， m---试样质量，g；

C-----据电位值查得的浓度，

总离子强度缓冲液：现配现用，3mol/L乙酸钠；0.75mol/L柠檬酸钠，配成（1+1）。 测定时，用蒸馏水洗电极装置至值为-370以后。

（三）磷（P）的测定

磷标准曲线的绘制：准确移取磷标准溶液（分析纯的磷酸二氢钾，在105℃干燥1h，冷却后称取0.2195g，溶于1L的容量瓶中，加硝酸3ml，用水稀释至刻度，得到50ug/ml溶液），分别吸取0.0、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0、12.0、15.0ml于50ml容量瓶中，各加入磷显色液（钒-钼酸铵显色液：偏钒酸铵1.25g，加250ml硝酸于1000ml容量瓶中；钼酸铵25g于烧杯中，加400ml水溶解，冷却下，将此液倒入容量瓶中，定容）10ml，用蒸馏水定容，

篇三：实验室常用溶液的配制标准程序

实验室常用溶液的配制标准程序 3 、 适用范围

XXXX研发部常用溶液：3M 醋酸钠、 2N NaOH 、 5M NaCL、 Solution Ⅰ 、 Solution Ⅱ Solution 、 Solution Ⅲ 、 LB培养基、 1M Tris-HCl 、 10 ×TE Buffer 、 10 × PBS Buffer 、 苯酚/ 氯仿/ 异戊醇 、 10%（W/V ）SDS 、 0.5M EDTA(pH 8.0) 、 50 ×TAEBUffer 、 20 ×SSC 、 封闭缓冲液（Wester杂交） 。

4 、 配制

4.1 、 用具

干燥洁净的200ml量桶一只，三角烧瓶两只，天平一架，250ml、1000ml广口瓶各一只。

4.2 、 配制步骤

4.2.1 、 配制NaAC溶液

⑴用天平称取40.8克分析纯的NaOAC固体，置于250ml三角烧瓶中。

⑵用100ml量桶准确取40ml去离子水，摇荡三角烧瓶使NaOH固体充分溶解

⑶加去离子水将溶液定容到100ml

⑷高压灭菌后，室温保存。

4.2.2 、 配制NaOH溶液

⑴用100ml量桶准确取80ml去离子水，置于250ml三角烧瓶中。

⑵用天平称取8克NaOH固体缓缓加入三角烧瓶中。

⑶摇荡混匀溶液。用去离子水将溶液体积定容到100ml。

⑷将混匀的溶液转移入玻璃瓶中，室温保存。

4.2.3 、 配制NaCL溶液

⑴用天平称取292.2克NaCL固体置于1L烧杯中，加入800ml的去离子水后搅拌溶解。

⑵加去离子水将溶液定容至1L，适量分成小份。

⑶高压灭菌后，4 0 C 保存。

4.2.4 、 配制 Solution Ⅰ 溶液

（1） 量取1M Tris-HCL(ph8.0) 25ml ,1.5M EDTA(ph8.0) 20ml , 20 %Glucose(1.11M) 45ml, dH 2 O 910ml , 置于1L烧杯中。

（2） 高温高压灭菌后，4 0 C 保存。

（3） 使用前每50 ml的 Solution Ⅰ 加入2 ml 的RNaseA（20mg / ml).

4.2.5 、 配制 Solution Ⅱ 溶液

(1) 量取10 %SDS 50 ml, 2N NAOH 50 ml, 置于500 ml 烧杯中。

(2) 加灭菌水定容至 500 ml,充分混匀。

(3) 室温保存。此溶液保存时间最好不要超过一个月。

注意：SDS易产生气泡，不要剧烈搅拌。

4.2.6 、 配制 Solution Ⅲ 溶液

（1） 称量KOAc 147g, CH 3 COOH 57.5g， 置于500 ml 烧杯中。

（2） 加入300 ml去离子水后搅拌溶解。

（3） 加去离子水将溶液定容 至 500 ml。

（4） 高温高压灭菌后，4 0 C 保存。

4.2.7 、 配制 LB培养基

（1） 称取T ryptone 10g, Yeast Extract 5g, NaCl 10g， 置于1L烧杯中。

（2） 加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。

（3） 滴加5 N NAOH（约0.2ml），调节ph值至7.0。

（4） 加去离子水将培养基 定容 至 1L。

（5） 高温高压灭菌后，4 0 C 保存。

4.2.8 配制 1M Tris-HCl(pH7.4,7.6,8.0)

（1） 称量121.1g Tris置于1L烧杯.

（2） 加入约800ml的去离子水。充分搅拌溶解。

（3） 按下加入70ml pH7.4, 60 pH7.6,42ml pH8.0浓盐酸调节所需要的值。

（4） 将溶液定容至1L。

（5） 高温高压灭菌后，室温保存。

注意：使溶液冷却至室温后在调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液的值大约降低0.03个单位。

4.2.9 、 配制1L 10 ×TEBuffer(pH7.4,7.6,8.0) 100mM Tris-HCl,10mM EDTA

（1）量取溶液1M Tris-HClBuffer(pH7.4,,7.6,8.0)100ml,500mM EDTA(pH 8.0) 20ml，置于1烧杯中。

（2）向烧杯中加入800ml的去离子水，均匀混合。

（3）将溶液定溶至1L后，高温高压灭菌。

（4）室温保存.

4.3.10 、 配制 1L 10 × PBS Buffer 1370mM NaCl, 27mM KCl,10mM Na 2 HPO 4 ,20mM KH 2 PO 4 .

（1）称量NaCl 80g , KCl 2,Na 2 HPO 4 14.2g , KH 2 PO 4 ,2.7g 置于1L烧杯中。

（2） 向烧杯中加入800ml的去离子水，充分搅拌溶解。

（3）滴加HCl将pH值调节至 7.4 ，然后加入去离子水将溶液定容至1L。

（4）高温高压灭菌，室温保存。

注意：上述PBSBuffer中无二价阳离子，如需可在配方中补充1mM CaCl 2 和0.5mM MgCl 2 。

4.3.11 配制 苯酚/ 氯仿/ 异戊醇 （25：24：1）

（1）说明：从核酸除去蛋白质常使用苯酚/氯仿/异戊醇（25：24：1）。氯仿可使蛋白质变性并有助于液相与有机向的分离，而异戊醇有助于消除抽屉过程中出现的气泡。

（2）配置方法：将平衡苯酚与等体积的氯仿/异戊醇（24：1）均匀混合和后，移入棕色玻

璃瓶中4℃保存。

4.3.12 配制 10%（W/V ）SDS 100ml

（1）称量10g高重度的SDS置于100-200ml烧杯中，加入约800ml的去离子水，68℃加热溶解。

（2）滴加数滴浓盐酸调节pH值至7.2.

（3）将溶液定容至100ml后，室温保存。

4.3.13 、 配制 1L 0.5M EDTA(pH 8.0)

（1）称取186.1gNa 2 EDTA.2H 2 O，置于1L烧杯中。

(2）加入800ml去离子水，充分搅拌。

(3）用NaOH调节pH值至8.0（约20g NOH） 注意：pH值至8.0时才能完全溶解。

（4）加去离子水将溶液定容至1L.

(5)适量分成小分后，高温高压灭菌。

（6）室温保存。

4.3.14 配制 1L 50 ×TAE BUffer (pH8.5) 2M Tris 醋酸,100mMEDTA

（1）称量试剂Tris 242g , Na 2 EDTA.2H 2 O 37.2g，置于1L烧杯中。

（2）向烧杯中加入约800ml的去离子水，充分搅拌并溶解。

（3）加入57.1ml的醋酸，充分搅拌。

（4）家去离子水定容至1L后，室温保存。

4.3.15 、 配制 1L 20 ×SSC 3.0M NaCl, 03M 柠檬酸钠

（1）称量试剂NaCl 175.3g ,柠檬酸钠.2H 2 O 88.2g ，置于1L烧杯中。

（2）向烧杯中加入约800ml的去离子水，充分搅拌溶解。

（3） 滴加14 N HCl，调节pH值至7.0后，加去离子水定容至1L.

（4）高温高压灭菌后室温保存。

4.3.16 配制 100ml 预杂交液 /杂交液（DNA杂交用），6 ×SSC (或SSPE) ，5×Denhardts 0.5%(WV) SDS , 100μg / ml Salmon DNA

（1）称量试剂 30ml 20 ×SSC (或SSPE),10ml 50×Denhardts, 5ml 10 % SDS, 1ml 10μg / ml Salmon DNA,54m dl2H 2 O ，置于200ml烧杯中。

（2）充分混匀后，使用0.45 μm 滤膜滤去杂质后使用。

4.3.17 、 配制 100ml 封闭缓冲液（Wester杂交） 5%(W/V)脱脂奶粉 TBST BUffer

（1）称量5g脱脂奶粉加入到100ml的TBST Buffer中，充分搅拌溶解。

（2）24℃保存待用（本封闭液应现配现用）

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